無血清細(xì)胞凍存液說明書
一、產(chǎn)品簡介
欣潤生物研發(fā)中心長期經(jīng)過對一系列類型細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇試驗(yàn)，精心研制的無血清細(xì)胞凍存液具有獨(dú)特的配方，解決了細(xì)胞在冷凍、儲存和復(fù)蘇過程中的細(xì)胞損傷、細(xì)胞活性低、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變及特定基因表達(dá)改變等問題，為細(xì)胞提供了安全可靠的超低溫儲存環(huán)境。
該凍存液配方成分獨(dú)特、明確，包含DMSO，不含動物來源蛋白，不含血清，可減少各類細(xì)菌、真菌、支原體和病毒等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。該即用型細(xì)胞凍存液，儲存細(xì)胞時可將細(xì)胞凍存懸液直接存放于-80℃冰箱凍存，無需程序降溫步驟。
該凍存液適用于THP-1、RPMI8226、22RV1和Caco-2等比較難凍存復(fù)蘇的細(xì)胞系，永生化細(xì)胞類型，間充質(zhì)干細(xì)胞、IPS、血液來源細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等原代細(xì)胞及部分對凍存條件比較敏感的細(xì)胞儲存。
二、使用說明
1、凍存步驟：
（1）將常規(guī)方法收集的對數(shù)期貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中，然后離心收集細(xì)胞沉淀；
（2）棄去離心管中的上清液，加入適量的預(yù)冷細(xì)胞凍存液（2-8℃）于離心管中，使細(xì)胞濃度約為0.5～10×106/ml，用滴管輕柔地混勻細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液；
（3）將離心管中的凍存細(xì)胞懸液分裝于已標(biāo)記的凍存管中，建議每管分裝1mL體積；
（4）直接將分裝好的細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中，無需程序降溫步驟；
（5）如果需要將凍存細(xì)胞放置液氮中長期儲存，需先將凍存細(xì)胞懸液放入-80℃冰箱16小時左右，然后方可將凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮罐中保存。
2、復(fù)蘇步驟：
1）取出細(xì)胞凍存管，快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至含5ml完全培養(yǎng)基的無菌離心管中，180-300g×5min離心，棄上清，注意不要吸除細(xì)胞沉淀；
3）向細(xì)胞沉淀中加入適量新鮮完全培養(yǎng)基，用滴管充分混勻細(xì)胞沉淀；鏡檢后，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行鋪板細(xì)胞培養(yǎng)。
三、儲存條件
2-8℃，避光儲存，有效期12個月
四、產(chǎn)品應(yīng)用
本產(chǎn)品僅用于科研用途， 不可用于診斷、 治療、 臨床、 家庭及其他用途。
